GelRed 和GelGreen是设计以取代剧毒的代替高毒性的溴化乙锭（EtBr）的新一代核酸凝胶荧光染料。Biotium科学家研发的GelRed 和GelGreen集低毒性、高灵敏性和出色的稳定性等优点于一体，效果由于EtBr及其他EtBr替代品。

几十年来，EtBr因极其低廉的价格，一般的灵敏度，一直被用作核酸凝胶染色的主要染料。然而EtBr是一个高度诱变的物质。该染料的使用安全隐患，净化及废物处置的相关费用等，终导致其代价高昂。正因如此，近年来市场上出现了一些替代品，如SYBR系列染料等。尽管这些替代染料减少了致突变性，但却丧失了染料其他方面的功能。例如，SYBR Safe的灵敏度很低，SYBR Green及SYBR Gold的稳定性远远低于EtBr。SYBR染料能快速的进入细胞，结合线粒体及细胞核DNA，是的染料在一定浓度是有毒的。事实上，在紫外线或其他诱变剂诱导下，SYBR Green I 强烈的突变性已经被广泛认知。（Ohta，et al.Mut Res 492,91(2001)）

为了保证GelRed和GelGreen的安全性，Biotium的科学家采用一种新型非常简单的概念：阻止染料进入活细胞减少遗传毒性。我们相信，不给DNA结合染料渗透活细胞中结合基因组DNA的机会，便可以保证染料没有或大幅度减少其诱变性作用。因此，我们设计的GelRed和GelGreen 染料拥有独特化学结构保证其无法渗透细胞膜。Ames试验验证即使浓度远远高于实验者操作凝胶染色的工作浓度，GelRed和GelGreen也无诱变性。此外，环境的安全性试验表示，GelRed和GelGreen是完全无害的，对水生生物无毒。因此，废弃的GelRed和GelGreen可以直接倒入下水道，或按照普通垃圾处理。

无论是作为预制凝胶染料染色或电泳后染色，GelRed和GelGreen染料都是搞灵敏度的。312/302nm的紫外光透射下，GelRed灵敏度远远超过EtBr，与SYBR Gold灵敏度相当，后凝胶染色法GelRed效果更明亮。与SYBR Gold不同的是，GelRed 也可以被作高度灵敏的与之惊叫预制凝胶染色。GelGreen是用于488nm激光凝胶扫描仪或者可见蓝光激发的Dark Reader 的研究人员使用要求。GelGreen光谱类似于SYBR Safe，但比后者更为灵敏。

GelRed和GelGreen另一个主要优势是其显著的稳定性。可以用操作EtBr同样的方式操作两种染料。这意味着，染料在水中是非常稳定的，可以在室温下长期储存，也可以在微波中加热进行预制凝胶。这两种燃料也非常耐光，暴露在室内灯光下也比较稳定。

EB GelRed SYBR Safe GelGreen

图1. GelRed 和GelGreen比EB和SYBR Safe更灵敏。左图：比较了GelRed 和EB 的1%预制胶，TBE缓冲液跑胶。右图：比较了GelGreen和SYBR Safe 1%琼脂糖凝胶的后染状况，同样在TBE缓冲液中完成。选用了Invitrogen的1 Kb的DNA Ladder作2倍稀释，分别加入四个泳道中，从左向右依次为200ng，100ng，50ng和25ng。

图2. 在37°C下，分别使用1X SYBR Green I, SYBR Safe, GelRed and GelGreen 对HeLa 细胞进行孵化，并分别在5分钟（A)和30分钟（B）后观察。实验显示SYBR染料迅速进入细胞并将细胞内的核酸染成亮绿色（以上仅图示 SYBR Green 1），而 GelRed 和 GelGreen 则因为不能穿透细胞膜而完全没有进入细胞内, 足以证明GelRed和GelGreen是安全的。

 

图 3. GelGreen （绿色） GelRed （红色）在 PBS 缓冲溶液中结合 dsDNA 后的激发和发射光谱。

 

图 4. 室温下， GelRed （ 500 nm ）和 SYBR Gold （ 488 nm ）稀释在 1 × TBE 凝胶染色液中测得的吸光度随时间变化图。 GelRed 和 SYBR Gold 初始的吸光度值分别为 0.029 和 0.051 。

GelRed 和GelGreen特点：

比EtBr安全：

艾姆斯氏实验以及其他实验证实无诱变性无细胞毒性；

方便处理：

通过了环境安全实验，可以直接丢弃无需特殊处理。

超高的灵敏度：

比EtBr和SYBR Safe更灵敏。

极高的稳定性：

溶于水中，室温下能长期保存，微波炉加热性能稳定。

广泛的适用性：

适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色。

简单的步骤：

预制凝胶和凝胶电泳后染色。

兼容标准紫外凝胶成像系统及可见光激发的凝胶观察装置：

使用312nm激发的UV凝胶成像系统时，GelRed可以替代EB;无需改变成像条件；GelRed 可用EB常用仪器观察；GelGreen可用SYBR染料仪器进行观察。GelRed 可以替代 EB ； GelGreen 足以替代任意一种 SYBR 染料。

可用于下游实验：

普通的胶回收后，可用于下游实验。

产品信息：

Cat#	Product Name	Unit Size	品 牌
41001	GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 3X in water	4.0 L	Biotium
41002	GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO	0.5 mL	Biotium
41003	GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water	0.5 mL	Biotium
41003-1	GelRedTM 10,000X solution in water, bulk pack	10 mL	Biotium
41004	GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO	0.5 mL	Biotium
41005	GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water	0.5mL	Biotium