型号: | BPE |
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品牌: | BP |
原产地: | 中国 |
类别: | 化工 / 生物化学品 |
标签︰ | elisa , 试剂 , 抗体 |
单价: |
¥1980
/ 盒
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最少订量: | 1 盒 |
使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人成纤维细胞生长因子(FGF),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用 途: 用于人组织及相关液体样本中成纤维细胞生长因子(FGF)的测定。
工作原理
本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人成纤维细胞生长因子(FGF)的水平。向预先包被了人成纤维细胞生长因子(FGF)单克隆抗体的酶标孔中加入成纤维细胞生长因子(FGF),温育;洗涤后,加入HRP标记过的成纤维细胞生长因子(FGF)抗体。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人成纤维细胞生长因子(FGF)的浓度呈正相关。
试剂盒组成
1 | 标准品(16µg/L) | 0.5ml | 7 | 显色剂A液 | 3ml |
2 | 标准品稀释液 | 3ml | 8 | 显色剂B液 | 3ml |
3 | 酶标包被板 | 12孔×4条 | 9 | 终止液 | 3ml |
4 | 酶标试剂 | 3ml | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 20倍浓缩洗涤液 | 20ml | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 样品稀释液 | 3ml | 12 | 密封袋 | 1个 |
需要而未提供的试剂和器材
1.
2. 标准规格酶标仪。
3. 精密移液器及一次性吸头
4. 蒸馏水,
5. 一次性试管
6. 吸水纸
注意事项
1. 从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
3. 建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
4. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
5. 为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7. 底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
标本要求
1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
操作程序
1. 标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释):
8µg/L | (5号标准品) | 120μl的原倍标准品加入120μl的标准品稀释液 |
4µg/L | (4号标准品) | 120μl的5号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
2µg/L | (3号标准品) | 120μl的4号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
1µg/L | (2号标准品) | 120μl的3号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
0.5µg/L | (1号标准品) | 120μl的2号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
2. 分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入稀释好的标准品50μl;在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。轻轻晃动混匀,
3. 弃去液体,甩干,每孔加满稀释后洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
4. 每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。轻轻晃动混匀,
5. 弃去液体,甩干,每孔加满稀释后洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
6. 每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,
7. 取出酶标板,每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8. 测定:以空白孔调零,在450nm波长下测量各孔的吸光度值(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
9. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的,其实际浓度应该乘以总稀释倍数。
上海朗顿生物科技有限公司 | |
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国家/地区︰ | 上海市黄浦区 |
经营性质︰ | 贸易商 |
联系电话︰ | 13045656500 |
联系人︰ | 廖凯文 (销售经理) |
最后上线︰ | 2022/05/10 |