疏水作用色谱(HIC)是通过目的物与连接在不带电基质上的疏水配基的相互作用达到分离的目的。样品在高离子强度条件下与配基结合，随着离子强度降低被洗脱下来。不同的分子和配基的疏水反应的强度不同，因而洗脱的顺序不同。已开发出的多种不同的基质和配基可广泛应用于生物分子下游纯化的不同阶段。