【摘要】
克伦特罗属于β—兴奋剂,是一种人和兽医作为治疗哮喘的药物。在牲畜中超剂量使用可以使脂肪组织转化为肌肉组织,由于能够显著改善脂肪率和生产效率,β兴奋剂往往被滥用于畜牧养殖生产中。近来又有一些非法使用克伦特罗作为饲料添加,并存在滥用现象。国家已经明令禁止克伦特罗在动物饲养中使用。
本品是一种不需要任何仪器设备的尿液检测法,应用单克隆抗体技术从而特异性地定性检测尿液中的克伦特罗。本品阈值为3ng/ml。
【测定原理】
本试剂运用抗原抗体的特异反应以及侧向层析和胶体金技术进行尿液中克伦特罗分子的快速定性检测。用BSA偶联的克伦特罗分子与胶体金颗粒结合后,包被在醋酸纤维素膜上;在硝酸纤维素膜上将克伦特罗抗体和BSA抗体分别包被在检测区(T)和质控区(C)。当尿液样本加样孔后,样本中的克伦特罗分子与克伦特罗-BSA-胶体金偶联物一起层析泳动到检测区竞争与克伦特罗抗体结合,剩余的克伦特罗-BSA-胶体金继续泳动到质控区与抗体结合。因此,当样本中的克伦特罗浓度超过一定量后,胶体金偶联物就不能与克伦特罗抗体结合,因此,当样本中的克伦特罗浓度超过一定量后,胶体金偶联物就不能与克伦特罗抗体结合,此时检测区不出现紫红色线条;当样本中克伦特罗浓度低于一定值或样本中没有克伦特罗时,胶体金偶联物就与克伦特罗抗体结合,从而在检测区显示出一条紫红色线条;而无论样本中是否含有克伦特罗分子,质控区都会出现紫红色线条,以示检测有效。
【包装组成】
克伦特罗胶体金法检测卡(20份)
一次性塑料滴管(20支)
塑料一次性手套(5只)
使用说明书(1份)
【检测所需设备】
计时器
一次性洁净塑料尿杯或玻璃容器
【标本收集】
尿液标本必须收集在洁净、干燥不含有任何防腐剂的塑料尿杯或玻璃容器内。若不能及时送检,尿样标本在2ºC-8ºC冷藏可保存48小时。长期保存需冷冻于-20ºC,忌反复冻融。
【操作步骤】
在进行测试前必须先完整阅读使用说明书,使用前将检测卡和尿样标本恢复至室温。
1. 从原包装铝箔袋中取出检测卡,在1小时内应尽快地使用。
2.将试剂盒置于干净平坦的台面上,用塑料吸管垂直滴加2滴无空气泡的尿样(约60ul-80ul)于加样孔(S)内。等待紫红色条带的出现,测试效果应在5分钟时读取。
【判断结果】
阳性(+):仅质控区(C)出现一条紫红色条带,在测试区(T)内无紫红色条带出现。阳性结果表明:克伦特罗含量在阈值(3ng/ml)以上。
阴性(-):两条紫红色条带出现。一条位于测试区(T)内,另一条位于质控区(C)内。阴性结果表明:克伦特罗含量在阈值(3ng/ml)以下。
无效:质控区(C)未出现紫红色条带,表明不正确的操作过程或检测卡已变质损坏。在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的检测卡重新测试。如果问题仍然存在,应立即停止使用此批号产品,并与当地供应商联系。
【灵敏度】
本品肉眼判定阈值为3ng/。
【存储】
原包装应储存于阴凉避光干燥处,有效期24歌月。忌冷冻或者在已过有效期后使用。
【注意事项】
1. 操作失误,以及标本中存在干扰物质,有可能导致错误的结果,请查阅在特异性中列出的能引起
阳性结果的物质。
2.不洁净的尿,如含有漂白剂、明矾,可能在正确的分析操作方法下也会产生错误的结果。
3.一定注意未使用产品的防潮保护,确保封口的紧密封口的紧密度,否则会产生错误或者不确定的结果。
4.滴加样品的过程在一定程度上影响产品的有效判断,因此,请务必严谨操作。
5.当实验操作环境温度过低时,会影响线条浓淡,并可能出现假阳性结果,建议操作环境温度最好不低于10 ºC.
6.较为混浊的尿液样本建议离心或过滤以后用于检测。
7.克伦特罗胶体法检测卡仅是一种定性的筛选鉴定,不能确定克伦特罗在尿样中的精确浓度。判定为阳性的精确浓度。判定为阳性的样本需要用其他方法(HPLC、GC/MS)复合确定。