CELL-WISE的293培養基是徠創生物自主研發的一款培養基,一流的質量,平民的價格。全國誠招代理商,歡迎廣大新老客戶前來咨詢。
CELL-WISE 293無血清培養基信息:
品牌 |
產品名稱 |
貨號 |
規格 |
報價(RMB) |
CELL-WISE |
BalanceCD293 培養基 |
CW01001 |
1L |
400 |
293無血清培養基產品描述:
Balance CD 293 培養基適用於懸浮培養條件下的HEK293細胞(如293-F,293-T, Expi-293F
等)的高密度生長和瞬時轉染表達。 Balance CD 293 培養基含有細胞生長所需的全部營養成份,無需添加任何添加物即可使用。(注意:此培養基不包含抗生素以及血清)
293無血清培養基產品特點:
瞬時轉染專用培養基,適用於HEK293細胞高密度懸浮培養
無蛋白、無動物源、化學成分限定
即用型完全培養基,無需添加額外成分
CELL-WISE的293無血清培養基技術參數:
外觀: |
澄清透明紅色液體 |
滲透壓: |
275±15 mOSM |
pH: |
6.9-7.4 |
無菌檢測: |
無菌 |
內毒素: |
<5 EU/mL |
儲存條件: |
2-8℃,避光 |
效期: |
12個月 |
產品用途: |
僅用於科學研究,不適用於人類或動物的診斷和治療 |
CELL-WISE的293無血清培養基使用方法:
細胞馴化
1)直接馴化
大部分情況下,培養于其他培養基中的細胞,可以直接適應Balance CD 293 medium,只要按照日常傳代方式(稀釋)更換培養基即可。
2)漸進式馴化
注意:選用低代次、處於對數生長期的細胞進行馴化
①在原培養基中復甦細胞並繼續使用該培養基傳代2到3次至細胞生長穩定,當細胞密度達到2x10 6 cells/ml后進行傳代,傳代細胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL,5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293培養基的比例為75:25;
②將細胞置於37℃,5% CO2,轉速為110-175 rpm的恆溫搖床中進行培養;
③當細胞密度3-4天后達到3x10 6 cells/ml且細胞活率>90%,傳代時5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293培養基的比例為50:50,細胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如細胞生長慢,可離心上清,留20%條件培養基,加入80%的5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293 培養基比例為75:25的混合培養基,繼續培養;
④重複步驟③逐步增加Balance CD 293培養基所占的比例(5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與Balance CD 293 培養基的比例為25:75至10:90)直到100%的Balance CD 293培養基;
⑤經過在100%的 Balance CD 293 培養基中的幾次傳代培養,傳代后3-4天細胞的密度可以達到2-3×10 6 cells/mL,細胞活率大於90%,這說明細胞已經完全適應了Balance CD 293 培養基。之後進行細胞的傳代培養時,細胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL,一般傳代2-3次后再進行轉染實驗。
注意: 一般細胞馴化過程中,前三代細胞的狀態可能不是很好,但一般從第四代狀態會有改善。
細胞傳代
1)取細胞培養樣品,人工或儀器測定細胞密度以及活率;
2)計算傳代所需的細胞用量,建議起始細胞密度為0.2-0.4×10 6 cells/mL。建議復甦的細胞至少培養兩代后再用於其他用途。傳代培養體積建議為15-20 mL(100 mL的培養瓶)或50-60 mL(250 mL 的培養瓶);
3)將細胞置於37℃,5%CO2,轉速為110-175 rpm的恆溫搖床中進行培養,3-4天傳代一次。
細胞轉染在Balance CD 293培養基中,採用商業化轉染試劑(例如 Gibco 293Fectin™ExpiFectamine™ 293 Transfection Kit )或 PEI 可以實現對 HEK293 細胞的高效轉染。
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最後上線︰ | 2017/11/20 |