【產品名稱】：桑葉提取物Mulberry Leaf Extract

【產品別名】：鐵扇子 桑葉提取物 桑葉多糖 桑葉黃酮 桑葉DNJ脫氧野尻黴素

【英文名稱】：Mulberry Leaf Extract

【使用部位】：桑科植物桑Morus alba L. 的葉
【主要成分】：黃酮、生物碱、多糖等多種活性物質

【植物來源】：桑葉，落葉喬木，高3～7米或更高，通常灌木狀，植物體含乳液。樹皮黃褐色，枝灰白色或灰黃色，細長疏生，嫩時稍有柔毛。葉互生;卵形或橢圓形，長5～10釐米，最長可達20釐米，寬5～11釐米，先端銳尖，基部心臟形或不對稱，邊緣有不整齊的粗鋸齒或圓齒;葉柄長1.5～4釐米；托葉披針形，早落。花單性，雄雌異株；花黃綠色，與葉同時開放；雄花成柔荑花序;雌花成穗狀花序；萼片4裂；雄花有雄蕊4：雌花無花柱，柱頭2裂，向外卷。聚合果腋生，肉質，有柄，橢圓形，長1～2.5釐米，深紫色或黑色，少有白色的。花期4～5月。果期6～7月。全國各地有栽培。以江蘇、浙江一帶為多。本信息是由Chemicalbook的賈杰編輯整理。

【成分性質】：葉含芸香甙槲皮素、異槲皮甙、槲皮素-3-三葡萄糖甙、微量的β-谷甾醇β-D-葡糖甙、蛇麻脂醇、內消旋肌醇、昆虫變態激素牛膝甾酮和蛻皮甾酮、溶血素、綠原酸。揮發油成分中有乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸、異戊酸、己酸、異己酸、水楊酸甲酯、愈創木酚、酚、鄰苯甲酚、間苯甲酚、丁香油酚等。又含草酸、延胡索酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸、棕櫚酸、棕櫚酸乙酯、三十一烷、羥基香豆精、蔗糖、果糖、葡萄糖、天門冬氨基酸和各氨酸等氨基酸。並含維生素C、谷胱甘肽、葉酸、5-甲酰四氫葉酸、維生素B1、維生素B2、腺嘌呤、膽碱、胡蘆巴碱，以及銅、鋅、硼、錳等。
槲皮素： 分子式C15H10O7，分子量302.25，mp 316℃。含水物分子式C15H9O7·2H2O，黃色結晶，mp 313℃～314℃ (分解)。溶于熱乙醇 (1：23)、冷乙醇 (1：300)，可溶于甲醇、醋酸乙酯、冰醋酸、吡啶等，不溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿中，幾乎不溶于水。

【存儲條件】：避光儲存於密封容器中

 

【原料採購標準】：

項目	指標
性狀	本品多皺縮、破碎。完整者有柄，葉片展平后呈卵形或寬卵形，長8〜15cm，寬7〜13cm。先端漸尖，基部截形、圓形或心形，邊緣有鋸齒或鈍鋸齒，有的不規則分裂。上表面黃綠色或淺黃棕色，有的有小疣狀突起；下表面顏色稍淺，葉脈突出，小脈網狀，脈上被疏毛，脈基具簇毛。質脆。氣微，味淡、微苦澀。
鑑別	薄層色譜在與對照桑葉藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光條斑。
水分%	≤15.0（CP2015通則0832第二法）
總灰分%	≤13.0（CP2015通則2302）
酸不溶性灰分%	≤4.5（CP2015通則2302）
浸出物%	照醇溶性浸出物測定法（CP2015通則2201)項下的 熱浸法測定，用無水乙醇作溶劑≥5.0
蘆丁%	照高效液相色譜法(CP2015通則0512)測定本品按乾燥品計算，含葛根素≥0.1%

 

 

 

 

【產品規格】桑葉提取物有常用的規格有桑葉多糖、桑葉黃酮、DNJ。

 

 

 

桑葉多糖 規格單
項目	標準	方法
桑葉多糖                 %	≥5.0	白鴻2011版保健食品功效與成分檢測方法-葡聚糖的分光光度測定法
水分                    %	≤5.0	GB/T 5009.3
熾灼殘渣                %	≤5.0	GB/T 5009.4
重金屬（以鉛（Pb）計）mg/kg	＜20	GB/T 5009.12
菌落總數             cfu/g	＜1000	GB/T 4789.2
黴菌及酵母菌         cfu/g	＜100	GB/T 4789.15
大腸埃希菌	不得檢出	GB/T 4789.38
沙門菌	不得檢出	GB/T 4789.4
葡萄球菌	不得檢出	GB/T 4789.10

 

 

桑葉黃酮 規格單
項目	標準	方法
桑葉黃酮                 %	≥5.0	白鴻2011版保健食品功效與成分檢測方法-總黃酮的分光光度測定法
水分                    %	≤5.0	GB/T 5009.3
熾灼殘渣                %	≤5.0	GB/T 5009.4
重金屬（以鉛（Pb）計）mg/kg	＜20	GB/T 5009.12
菌落總數             cfu/g	＜1000	GB/T 4789.2
黴菌及酵母菌         cfu/g	＜100	GB/T 4789.15
大腸埃希菌	不得檢出	GB/T 4789.38
沙門菌	不得檢出	GB/T 4789.4
葡萄球菌	不得檢出	GB/T 4789.10

 

DNJ脫氧野尻黴素 規格單
項目	標準	方法
DNJ(脫氧野尻黴素）      %	≥1.0	白鴻2011版保健食品功效與成分檢測方法-DNJ的高效液相色譜法
水分                    %	≤5.0	GB/T 5009.3
熾灼殘渣                %	≤5.0	GB/T 5009.4
重金屬（以鉛（Pb）計）mg/kg	＜20	GB/T 5009.12
菌落總數             cfu/g	＜1000	GB/T 4789.2
黴菌及酵母菌         cfu/g	＜100	GB/T 4789.15
大腸埃希菌	不得檢出	GB/T 4789.38
沙門菌	不得檢出	GB/T 4789.4
葡萄球菌	不得檢出	GB/T 4789.10

 

【檢測方法】：保健食品中水溶性粗多糖的測定方法

1. 範圍

本方法規定了保健食品中以葡聚糖為主要結構分子量在10000以上的水溶性粗多糖的測定方法。

本方法適用於保健食品中以葡聚糖為主要結構分子量在10000以上的水溶性粗多糖的測定。

本方法最低檢出濃度：5.0mg/L。

本方法最佳線性範圍：5.0ug/mL—200ug/mL。

2. 原理

食品中分子量>10000的高分子物質在80%乙醇溶液中沉澱，與水溶液中單和低聚糖分離，用碱性二價銅試劑選擇性的從其它高分子物質中沉澱具有葡聚糖結構的水溶性多糖 ，用苯酚-硫酸反應以碳水化合物形式比色測定其含量，其顏色強度與水溶性粗多糖中葡聚糖的含量成正比，以葡萄糖為標準參照物並以此計算食品中水溶性粗多糖含量。

原理 多糖在硫酸的作用下先水解成單糖，並迅速脫水生成糖醛衍生物，然後與苯酚生成橙黃色化合物。再以比色法測定。

3．試劑

本方法所用試劑除特殊註明外，均為分析純；所用水為去離子水或同等純度蒸餾水。

3.1乙醇溶液(80%):20mL水中加入無水乙醇80mL，混勻。

3.2氫氧化鈉溶液(100g/L):稱取100g氫氧化鈉，加水溶解並稀釋至1L，加入固體無水硫酸鈉至飽和，備用。

3.3銅試劑儲備液:稱取3.0gCuSO4.5H2O，30.0g檸檬酸鈉，加水溶解並稀釋至1L， 混勻備用。

3.4銅試劑溶液：取銅儲備液50mL，加水50mL，混勻后加入固體無水硫酸鈉12.5g並使其溶解。臨用新配。

3.5洗滌劑：取水50mL，加入10mL銅試劑溶液，10mL氫氧化鈉溶液，混勻，臨用新配。

3.6硫酸溶液（10%）：取100mL濃硫酸加入到800mL左右水中，混勻，冷卻后稀釋至1L。

3.7苯酚溶液（50g/L）：稱取精製苯酚5.0g，加水溶解並稀釋至100mL，混勻。溶液置冰箱中可保存一月。

3.8葡萄糖標準儲備溶液:精密稱在硫酸乾燥器中乾燥至恆重的葡萄糖標準0.5000g，加溶解，並定容至50mL，混勻，置冰箱中保存。此溶液每毫升含10.0mg葡萄糖。

3.9葡萄糖標準使用液:吸取葡萄糖標準儲備液1.00mL，置於100mL容量瓶中，加水至刻度，混勻，置冰  箱中保存。此溶液每毫升含葡萄糖0.10mg。

4．儀器

4.1分光光度計

4.2離心機

4.3旋轉混勻器

5. 分析步驟

5.1標準曲線制備:  

精密吸取葡萄糖標準使用液0.00，0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00 mL(相當于葡萄糖，0.010，0.020，0.040，0.060，0.080，0.10mg)分別置於25mL比色管中，準確補充水至2.0mL，加入50g/L苯酚溶液1.0mL，在旋轉混勻器上混勻，小心加入濃硫酸10.0mL，于旋轉混勻器上小心混勻，置沸水浴中煮沸2min.，冷卻后用分光光度計在485nm波長處以試劑空白溶液為參比，1cm比色皿測定吸光度值。以葡萄糖濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪製標準曲線。

5.2試樣處理

5.2.1試樣提取:稱取混合均勻的固體試樣2.0g，置於100mL容量瓶中，加水80mL左右，于水浴上加熱2h，冷卻至室溫后補加水至刻度，混勻，過濾，棄去初濾液，收集餘下濾液供沉澱多糖。

5.2.2沉澱粗多糖:精密取5.2.1濾液5.0mL或液體試樣5.0mL，置於50mL離心管中，加入無水乙醇20mL，混勻5min.，以3000rpm離心5min.，棄去上清液。殘渣用80%乙醇溶液數毫升洗滌，離心后棄上清液，反復3—4次操作。殘渣用水溶解並定容至5.0mL，混勻，供沉澱葡聚糖。

5.2.3沉澱葡聚糖:精密取5.2.2溶液2mL置於20mL離心管中，加入100g/L氫氧化鈉溶液2.0mL，銅試劑溶液2.0mL，沸水浴中煮沸2min.，冷卻后以3000rpm離心5min.，棄去上清液。殘渣用洗滌液數毫升洗滌，離心，棄去上清液，反復3次操作，殘渣用100mL/L硫酸溶液2.0 mL溶解並轉移至50mL容量中，加水稀釋至刻度，混勻。此溶液為試樣測定液。

5.3試樣測定:精密吸取試樣測定液2.0 mL置於25 mL比色管中，加入50g/L苯酚溶液1.0 mL，在旋轉混勻器上混勻后，小心加入濃硫酸10.0mL后于旋轉混勻器上小心混勻，置沸水浴中煮沸2min.，冷卻至室溫，用分光光度計在485nm波長處，以試劑空白為參比，1cm比色皿測定吸光度值。從標準曲線上查出葡萄糖含量，計算試樣中水溶性粗多糖含量。同時作試樣空白實驗。

g;

 

   6. 技術參數

       回收率：不同食品中不同濃度加標回收的回收率為87.8～110.8%。

精密度：同一試樣10次測定結果的RSD為5.8%。

干擾因素：測定過程中避免碳水化合物的玷污干擾。  

   

【檢測方法】：桑葉黃酮 保健食品標準

C1總黃酮含量測定

C1.1試劑

C1.1.1聚酰胺粉

C1.1.2蘆丁標準溶液：稱取5.0mg蘆丁，加甲醇溶解並定容至100ml，即得50ug/ml

C1.1.3乙醇：分析醇

C1.1.4甲醇：分析醇

C1.1.5分析步驟

C1.2樣品處理：稱取一定量的樣品，加乙醇定容至25ml，搖勻后，超聲提取20min，放置，吸取上清液1.0ml，于蒸發皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上揮去乙醇，然後轉入層吸柱。先用20ml苯洗，苯液棄取，然後用甲醇洗脫黃酮，定容至25ml，此液于波長360nm測定吸收值，同時以蘆丁為標準品，測定標準曲線，求回歸方程，計算樣品中總黃酮含量。

C1.3蘆丁標準曲線

吸取蘆丁標準溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于10ml比色管中，加甲醇至刻度，搖勻，于波長360nm比色。求回歸方程，計算樣品中總黃酮含量。

C1.4計算和結果表示：

X=A×V2/V1/M/1000

式中：X-樣品中總黃酮含量，mg/100g

B-由標準曲線算得被測液中黃酮量，ug

M-樣品質量，g；

V1-測定用樣品體積，ml

V2-樣品定容總體積，ml

 

【檢測方法】：DNJ(脫氧野尻黴素） 保健食品標準

含量測定：1-DNJ>1%-30%（HPLC-ELSD 法）

   色譜條件:

色譜柱：SUPELCOSIL LC-NH2 5 µ，25 cm×4.6 mmID；

流動相：乙腈-水(80:20)；

流速：0．8mL·min-1；柱溫：40℃；ELSD

氣化室溫度 100℃；

氮氣流速：2.5 SLPM。

對照品溶液的制備：

分別精密稱取對照品 1-脫氧野尻黴素 11.40 mg，用甲醇溶解並定容至 10mL 容量瓶，搖勻，即得。

供試品溶液的制備:

 取本品 0.15 g，精密稱取，置於具濾紙的漏斗上，用乙醇約 20ml 分數次洗滌，濾紙及殘渣揮干乙醇，置錐形瓶中，精密加入 30%乙醇 50ml，稱定重量，加熱回流 30min，放冷，再稱定重量，用 30%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

測定法:

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各 5μl，測定，即得。