內毒素檢測---LAL

內毒素檢測---LAL
型號:ACC
品牌:ACC
原產地:美國
類別:服務業 / 商業代理 / 其他
標籤︰內毒素檢測 , LAL , 試劑
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產品描述

內毒素檢測---LAL (Limulus amebocyte lysate)試劑  
1956年,Bang 在研究鱟魚(Limulus polyphemus,俗稱馬蹄蟹)的一種格蘭氏陰性細菌性疾病時,發現該疾病會造成鱟魚血液凝集。進一步的研究則說明這種血液凝集現像是一連串的酵素反應,這些酵素是存在鱟魚的阿米巴細胞中(amebocytes),而誘導凝集的因子則是細菌細胞壁中的脂多醣(lipopolysaccharide,LPS,或稱內毒素,endotoxin,亦是主要熱源(pyrogen))。據此,發展出製造 LAL(Limulus amebocyte lysate)的方法及測試內毒素的最早方法-凝膠法。
※ 凝膠法操作
1. 取適當稀釋的標準內毒素或樣品 100μl + LAL試劑100μl
2. 于37±0.5℃非循環式水浴槽培育60±1分鐘
3. 判定結果:內容物呈凝膠狀則為凝集。內容物呈凝膠狀但下滑,或呈濃稠狀、維持液態,則為不凝集
【注意事項】
1. 本品為體外試驗試劑,嚴禁用於人體。
2. 本品用於藥品的細菌內毒素檢查時,應遵循藥典細菌內毒素檢查法的規定。
3. 使用安瓿包裝的鱟試劑在開啟時,應防止玻璃屑落入瓶內,開啟安瓿后應馬上使用。
【規格】(1)0.2 ml (2)2 ml;1 (3)2.2 ml (4)5 ml;(5)5.2ml
【靈敏度】(1)0.03 Eu/ml; (2)0.06 Eu/ml (3)0.125 Eu/ml; (4)0.25 Eu/ml; (5)0.5 Eu/ml; (6)1.0 Eu/ml。
【貯藏】 遮光,在冷處保存。
【包裝】 (1)0.2 ml小管; (2)2 ml安瓿;1 (3)2.2 ml安瓿 (4)5 ml安瓿;(5)5.2ml安瓿    (6)10支小管/盒; (7)10安瓿/盒;
※濁度法
濁度法:當有內素素存在的情況下, LAL 在形成凝膠前會先產生混濁,當內毒素含量愈高時,混濁愈快形成,混濁度可以由反應后讀取 OD 360 測知,並據此對樣品中的內毒素進行定量。理論上,濁度法可以有兩種定量方法:(1) 終點法  (2) 動力學法
※呈色法
呈色法是最新開發的 LAL 內毒素檢測方法。它仍以 LAL-endotoxin 反應為基礎,但在反應的最後加入無色的人工多肽基質,當此基質 p-nitroaniline(pNA)被酵素裂解時呈現黃色,並吸收 405nm 的光。因此,呈色法和濁度法相似,以測量不同濃度的標準品及樣品在反應后的 OD. 值,來定量樣品中的內毒素含量;也同樣有終點法及動力學法兩種測量方式。
在終點法的使用上,若樣品也會在 405 nm 吸光而造成干擾時,可在反應中加入溶有 nitrite 的 HCl 及 NEDA(N-(1-Naphthyl)-ethylenediamine),則形成 diazo 的洋紅色衍生物,在 540-550nm 吸光。
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最後上線︰2014/05/12