纳豆激酶粉

纳豆激酶粉
型号:20000FU5000FU
品牌:ACETAR
原产地:日本
类别:化工 / 有机原料 / 其它有机原料
标签︰5000FU , 2000FU , 10000FU
单价: -
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产品描述

【产品名称】:纳豆激酶

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【英文名称】:Nattokinase;Nattoesse Haruno-Ogawa;4-(carboxymethyl)-2-[(1R)-1-[[2-[(2,5-dichlorobenzoyl)amino]acetyl]amino]-3-methylbutyl]-6-oxo-1,3,2-dioxaborinane-4-carboxylic acid;4-(Carboxymethyl)-2-[(1R)-1-{[N-(2,5-dichlorobenzoyl)glycyl]amino}-3-methylbutyl]-6-oxo-1,3,2-dioxaborinane-4-carboxylic acid

    】:源自中国的咸豆豉,在日本得到发展,由黄豆通过纳豆菌(枯草杆菌)发酵制成豆制品。具有黏性,气味较臭,味道较甜,不仅保有黄豆的营养价值、富含维生素K2、提高蛋白质的消化吸收率,更重要的是发酵过程产生了多种生理活性物质。纳豆发酵过程中由纳豆枯草杆菌(Bacillus subtilisl natto)产生的一种丝氨酸蛋白酶。

【结构类型】:单链多肽,碱性蛋白酶
纳豆激酶的稳定性】:
1.pH稳定性
在自然pH值状态下,相对比较稳定,在pH值从7升至12时,室温下10min内稳定;pH值低于5时,则极为不稳定,很快失去活性;当温度超过60时则迅速因蛋白变性而失活。反复冻融五个循环时,其活性仍保存95%以上,从而表明冻融对纳豆激酶的活性无较大影响。当纳豆激酶与煮沸的小麦提取液、煮沸的肉汤以及血清蛋白和胃粘液蛋白混合后,纳豆激酶的稳定有明显增加,甚至在酸性pH值时,酶活性也并不完全失掉。
2.热稳定性
在温度低于45°C时活性相对稳定,高于60°C则因蛋白质变性而迅速失活,冻融对纳豆激酶的活性无较大影响,反复冻融5次后,该酶仍能保持95%以上的活性。
3.金属离子稳定性
纳豆激酶的活性还受一些金属离子的影响,Hg2+会使其完全失活,Cu2+Zn2+Al3+Ca2+等离子对该酶有不同的抑制作用,而Mg2+Co2+则对其有激活作用。
4.其他物质稳定性
E-ACAEDTA对纳豆激酶活性无明显影响,而PMSF能完全抑制其活性。1mmol/LDFPneguvon则能完全抑制纳豆激酶的活性。
【纳豆激酶分子量】:
纳豆激酶是一种单链多肽酶,由于测定分子量的技术方法不同,因此所测得到的分子量也有明显不同。用SephadexG100柱凝胶过滤法,得到的结果为20000,用园二色方法测定为27300。根据氨基酸顺序计算出该酶的准确分子量为27.728
【纳豆激酶PI值(等电点)】:
Svunsson的柱型电泳法,等电聚焦测定纳豆激酶具有对称的单一的纤溶酶峰,其PI值为8.6±0.3。等电点可以提供在分离提纯纳豆激酶时,考虑调pH值在PI值附近,有利于酶的纯化。
纳豆激酶的底物特异性】:

NK作为丝氨酸蛋白酶,其酰胺水解活性可通过许多合成底物进行观察。对纳豆激酶最敏感的底物为血浆纤溶酶的底物,即S2251;对底物H2DLArgPNAS2238S2266S2302具有一定的活性,而对S2444S2484则明显地无活性。纳豆激酶有其特异的水解蛋白的氨基酸作用和识别位点。

【存储条件】:避光储存于密封容器中

 

【产品规格】:

纳豆激酶(nattokinase,简称NK)是一种枯草杆菌蛋白激酶,是在纳豆发酵过程中由纳豆枯草杆菌(Bacillus subtilisl natto)产生的一种丝氨酸蛋白酶(单链多肽酶)。

含量为:5000Fu/g12000Fu/g20000Fu/g

 

纳豆激酶规格单

项目

标准

方法

纳豆激酶                     FU/g

20000

见下检测方法

色泽                      

 

类白色至浅黄色

外观                      

 

均匀、无可见异物的精细粉末

干燥失重                        %

8.0

CNS5033

重金属(以铅(Pb)计)          mg/kg

10

 

总生菌数                     cfu/g

1000

CNS10890

霉菌及酵母菌                 cfu/g

100

CNS12925

大肠杆菌

不得检出

CNS10951

沙门菌

不得检出

 

金黄色葡萄球菌

不得检出

 

 

纳豆激酶 FuFu/g的区别? 

  • .纳豆激酶在国际上的标准单位为“Fu”(fibrin degradation unit),是指每粒纳豆激酶产品的纳豆激酶含量; 
  • .Fu/g是指每克纳豆原料中的纳豆激酶含量.

 

 

 

【检测方法】:

  • 仪器与试剂(吸光值日本法)
    • 分光光度计。
    • 高速离心机。
    • 水浴锅
    • Vortex Mixer
    • 漏斗(直径8cm)ⅹ150m定量瓶ⅹ2、滤纸、50ml离心管ⅹ40Pipet5ml1ml0.2ml0.02ml)、ependoff16500ml6、培养皿ⅹ9、游标卡尺、Timer droper 1ml
  • 药品(吸光值法所需药品):
    • TCA WAKO 204-02405 试药特技 99%
    • CaSO42H2O Riedel dehaen 31221 99%
    • NaCl WAKO 191-01665 99%
    • Sodium AcetateCH3COONa3H2OAmresco 99%
    • CH3COOH
    • Triton X-100 SIGMA NO.T-68/8
    • Sodium Borate10H2O 日本试药工业 extra pure 99%
    • NaCl WAKO
    • Fibrinogen Sigma F-8630From Bovine plasma)。
    • Thrombin Sigma F-4648From Bovine plasma)。
    • NaOH
  • 溶液制备
    • Borate buffer 0.05MPH 8.5

Sodium Borate1010H2O 9.54g + NaCl 4.5g而后加入二次蒸馏水450ml,以HCl6M)调整PH8.5,最后使总体积为500ml

  • TCA Solution

TCA 16.34g + 二次蒸馏水至500ml

  • Dilution buffer

CaSO42H2O 0.177g

NaCl 0.292g

1M Sodium acetic buffer 1ml

10% Triton x - 100 0.25ml

二次蒸馏水加至 500ml

  • Triton x - 100

5.0g + 二次蒸馏水 45ml

  • 1M acetate buffer PH 6.0.

Sodium acetate 12.96g + 二次蒸馏水 50ml 并以 1M醋酸调整 PH6.0而后加入二次蒸馏水使总体积达100ml

  • Fibrinogen solution -2.

Fibrinogen 0.144g + Borate buffer 20ml 均匀搅拌使其完全

溶解(30分钟后)以滤纸过滤得到滤液既是。

  • Thrombin solution -1

5000IU Thrombin溶于10ml 0.85% NaCl solutionThrombin solution -1 浓度为500IU/ml。(需保存于-80)。

  • Thrombin solution -2

Thrombin solution -1 + 4.5ml 0.85% NaCl solution

  • Thrombin solution -3

Thrombin solution -1 200微升 + Borate buffer 4.8ml

  • 0.85% NaCl solution

0.85gNaCl + 100ml)二次蒸馏水。

  • 吸光值法需要配制药品12345710
  • 测定方法
    • 准备12支试管,为测量二个样品,准备实验组及空白组(样品*3,空白*3)。
    • 于试管中加入0.8ml Fibrinogen 2.8ml Borate Buffer0.05mol/L pH8.5),12支试管依序每隔20秒至于37℃水浴。
    • 五分钟时,每隔20秒加入Thrombin solution -3 0.2ml,并震荡10秒钟,实验组与空白组都要加。
    • 15分钟时,每隔20秒实验组加入nattokinase 0.2ml,震荡十秒钟,而对照组在17分钟时每隔20秒加入5ml TCA,并震荡10秒钟,19分钟时,每隔20秒加入nattokinase 0.2ml并震荡10秒钟。
    • 35分钟时,实验组及空白组每隔20秒震荡10秒钟。
    • 39分钟时,空白组至37℃水浴移行出来,吸取没管2.0ml到离心管,离心12000rpm 10分钟,测OD 275nm.rAs)。
    • 55分钟时,实验组及空白组每隔20秒,震荡10秒钟。
    • 75分钟时,实验组每隔20秒加入4.0ml TCA,震荡10秒钟。
    • 95分钟时,将实验组从37℃水浴中移行出来,吸取每管2.0ml到离心管,离心12000rpm 10分钟,测OD275 nm.rAb)。
  • 计算方式:

1单位活性(1FU),在本测试方法中,每分钟始OD 275 吸光值增加0.01的酵素量。

纳豆激酶酵素活性(FU/g= rAs - rAb/0.01/0.1/60 *D

rAs:待测液之吸光值

rAb:空白组之吸光值

D:样品稀释倍数

 

 

 

纳豆激酶粉 1

会员信息

西安天一生物技术股份有限公司
国家/地区︰陕西省西安市
经营性质︰生产商
联系电话︰18709273908
联系人︰李佳 (销售)
最后上线︰2023/01/03