一步法熒光定量耐熱反轉錄PCR試劑盒

產品名稱：ToneScript One Step SYBR qRT-PCR kit

英文名稱：ToneScript One Step SYBR qRT-PCR kit

產品編號：TK08045

產品規格：50 µl反應× 100次

儲存條件及有效期：試劑盒于-20℃避光保存，有效期12個月。

產品描述：

本試劑盒是採用SYBR Green I嵌合熒光法進行One Step qRT-PCR的專用試劑。使用本試劑盒進行qRT-PCR反應可在同一反應管內連續進行，操作簡單，並能有效防止污染。本反應體系由於可以對擴增產物進行實時檢測，大大提高了檢測的靈敏度，並省略了PCR反應后電泳的步驟，非常適合微量RNA的檢測。

產品特點：

本產品中使用了最適合於qRT-PCR的反轉錄酶ToneScript RTase和抗體修飾的具有高效擴增效率的Hot Start Taq Polymerase，能進行穩定的One Step qRT-PCR反應，可以快速、準確地對RNA病毒等微量RNA進行分析。本品可以在寬廣的定量區域內得到良好的標準曲線，對靶基因進行準確定量檢測，重複性好，可信度高。

準備材料：

實時熒光定量PCR儀、RNA模板、PCR引物、移液器槍頭。

注意事項：

1、根據不同的熒光定量PCR系統來決定ROX Reference Dye的使用。

2、當有多個樣品進行反應時，應先配製各種試劑的混合液，然後再分裝到每個反應管中，可使所取試劑體積準確，避免同一試劑多次吸取造成浪費，同時也減少每個樣品之間的誤差。

3、使用ToneScript One Step Enzyme Mix時應輕輕混勻，避免起泡，吸取應請短暫離心，將試劑收集到管底部，同時由於含有甘油，所以應緩慢吸取，並且槍頭不宜插入液面過深，造成損失。

4、2×One Step SYBR qRT-PCR buffer溶解后要充分混合，使用Vortex等振盪完全溶解后使用。

5、本制品中使用的 Hot Start Taq Polymerase是用Taq抗體修飾的 Hot Start 高效DNA聚合酶，與化學修飾型的 Hot Start DNA聚合酶相比，不需要PCR反應前的95℃，5-10 min的預變性，高溫處理時間過長，會使酶的活性下降，其PCR擴增效率和定量準確度都會受到影響。

6、本產品只能用基因特異反轉錄引物，不能使用Random Primer和Oligo dT Primer等進行反轉錄反應。

RNA模板制備注意事項

RNA模板可以採用總RNA或mRNA。本試劑盒將RNA反轉錄成cDNA，然後對cDNA進行擴增，RNA的純度會影響cDNA的合成量，制備RNA的關鍵是要抑制細胞中和環境中的RNase，防止RNA降解。因此，在實驗中戴一次性手套，使用RNA專用實驗台，實驗中避免講話等。相關實驗耗材應用0.1%DEPC（焦碳酸二乙酯）水溶液在37℃處理12 h，並高壓滅菌30 min后使用。

同科生物簡介：成立于2007年，是一家集研發、生產、銷售和技術服務于一體專注于生命醫學和生物技術領域的高科技企業。主營業務有科研產品、診斷試劑、分子診斷和技術服務等，主要服務于科研機構、大專院校、醫院和工業等客戶。

生產科研：同科生物搭建多個研發與合作技術平台（博士后實踐基地、院士工作站、同濟大學人才培養與產學研合作基地及生物研究中心等），為技術創新提供了堅實的基礎保障。擁有三類體外試劑生產中心、儀器生產中心、研發質檢實驗室等、廠房和實驗面積達8000多平米，儀器設備設施先進齊全（包括定量PCR儀、生物安全櫃、核酸蛋白測定儀、高壓細胞破碎儀、FPLC等系列高端精密儀器設備）。

研發團隊：同科擁有一支由中科院院士為顧問，國家千人為首席科學家，以博士碩士為主體的高效的國際化研發團隊。研發人員專業涵蓋生物化學、分子生物學、臨床醫學、免疫學、藥物制劑、生物技術、遺傳學、微生物學、生物工程領域，關聯性較大，專業結構合理，且形成互補，在重大項目及關鍵技術上具備卓越的攻關能力。

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